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    多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法

    發(fā)布時間: 2011/11/22  點擊次數(shù): 1577次
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    多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法

    長期以來,許多的研究者希望IHC方法更敏感、更穩(wěn)定、更簡單,要求多步檢測系統(tǒng)簡化,但敏感性要進一步提高,使這一技術(shù)面臨巨大的挑戰(zhàn)。在實踐中,往往是步驟減少了,敏感性也降低,這是一對矛盾。為了克服這一矛盾,為此嘗試了許多辦法,如催化信號放大系統(tǒng)(CSA)、免疫PCR、末端產(chǎn)物放大技術(shù)等方法,其敏感性增加了,但伴隨而來的高非特異性背景染色使應(yīng)用者難接受。

    一種新的多聚螯合物酶二步法在1995年被隆重推出,該方法與簡單的二步法相比較,具有很高的敏感性、穩(wěn)定性和特異性。目前,多聚螯合物酶法也稱非生物素檢測系統(tǒng),有三種不同物質(zhì)設(shè)計的多聚螯合物,它們是以碳為骨架(C—C—C—C—C—C—C一)的多聚螯合,主要構(gòu)成EnVision法的EnVision試劑。它的主要缺點是不易折疊,相對分子質(zhì)量大,形成空間障礙,使穿透細胞或核膜能力下降,影響到方法的敏感性,并常出現(xiàn)組織染色不均一。另一種是以多聚糖為骨架的多聚螯合物,主要用于PowerVision法,它可以折疊,使酶和抗體分子呈串珠樣緊密排列,其復(fù)合物顆粒小于EnVision試劑,其敏感性好于En—Vision法。第三種是以氨基酸類為骨架的多聚螯合物,主要用于UIP(universal immu—noperoxidasepolymer)法,其敏感性基本與PowerVision法相同。其缺點是多聚物中有N末端暴露,形成的電荷能和組織細胞發(fā)生靜電吸附,可造成非特異性染色,染色時需平衡靜電荷。

    UIP(universalimmuno—enzymepolymer)法,即通用免疫酶復(fù)合物法,是Nkhirei發(fā)明的一種新型免疫組化染色方法。其基本原理及工作流程與EnVision法相似,不同的是UIP復(fù)合物為HRP—氨基酸—抗鼠或抗兔IgG復(fù)合物(N—Histofine復(fù)合物)。因N—Histofine復(fù)合物相對分子質(zhì)量較EnVision復(fù)合物相對分子質(zhì)量稍小,理論上具有更強的穿透力。
    多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法
     

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